Stabila isotopmärkta peptider

Metabeskrivning

Need stable isotope labeled peptide for mass spectrometry quantification or internal standard? Science-Peptide provides professional stable isotope labeled peptide synthesis service, ¹³C, ¹⁵N, ²H single labeled or multi-labeled, abundance >99%, purity >95 %, högupplöst MS-validering. Förfrågningar är välkomna.

Stabila isotopmärkta peptider: Mer exakt kvantifiering, mer tillförlitliga resultat

Varför stabila isotopmärkta peptider?
Alla som gör proteomics eller metabolomics vet att intern standard är nyckeln till exakt masspektrometrisk kvantifiering. Stabila isotopmärkta peptider är kemiskt identiska med naturliga peptider, men lite tyngre, och kan separeras med masspektrometri, vilket är guldstandarden för absolut kvantifiering.

Var används stabila isotopmärkta peptider?
Absolut kvantifiering genom masspektrometri: som en intern standard för att korrigera för matriseffekter och joniseringseffektivitet.
SRM/MRM metodutveckling: etablera kvantitativa metoder, optimera masspektrometriparametrar
Metabolisk flödesanalys: för att spåra metaboliska vägar och beräkna flöden
Proteinhydrolyskinetik: för att studera effektiviteten av enzymatisk klyvning
Klinisk diagnostik: etablera kvantitativa metoder för sjukdomsmarkörer.

Vad vi kan göra

1. Isotoptyper, beroende på vad du behöver

Isotop	Märkning position	Massökning	Scenarier
¹³C	Aminosyra ryggrad kol	Baserat på antalet kolatomer	Vanligast använda, betydande förändring i masspektrum
¹⁵N	Amid eller sidokedjekväve	Varje kväve + 1	Dubbel-märkning med ¹³C
²H (D)	Väteatomer	+1 per deuterium	Billigt, men kan ha kromatografisk förändring
¹⁸O	C-terminalt karboxisyre	+2	Märkning efter klyvning, bra för tryptiska peptider.

2. Märkningsmetod, beror på hur många vikter du behöver

Märkning typ	Beskrivning	När du ska använda
Enkel märkning	Endast en isotop är märkt, t.ex. ¹³C	Rutinmässig kvantifiering, kostnad-kontrollerad
Dubbel märkning	Högre massförskjutning, t.ex. ¹³C+¹⁵N	Undviker överlappning med naturliga peptidisotoptoppar
Fullständig märkning	Alla aminosyror märkta	Metaboliska flödesstudier, sällsynta
Fläckmärkning	Placera-specifik märkning, t.ex. Lys-¹³C vid en viss position	Särskilda behov, design krävs

3. märkta peptider vi kan syntetisera
Enkel-märkta aminosyror: t.ex. ¹³C6-Arg, ¹³C5-förgrenade aminosyror, ¹⁵N2-Lys, etc.
Dubbel-märkta aminosyror: t.ex. ¹³C9,¹⁵N-Tyr, ¹³C6,¹⁵N4-Arg
Deuteriummärkning: t.ex. d3-Ala, d10-Leu, etc.
C-terminal ¹⁸O-märkning: märkning efter digestion, för tryptiska peptider

4. Syntesförmåga

Program	Förmåga
Peptidlängd	5-30 aminosyror (isotopmärkning av aminosyror är kostsamt, lämpligt för korta peptider)
Märkning webbplats	Enkla eller flera märkta aminosyror kan specificeras
Isotopöverflöd	>99%
Renhetsalternativ	Regular purity (95-98%), high purity (>98%)
Utbyte per remsa	0,5-10 mg (beroende på peptidlängd och märkningskomplexitet)
Leveransformat	Centrifugerör, flaskor
Cykeltid	2-4 veckor (anpassad märkning av aminosyror krävs)

5. Kvalitetskontroll: för att bekräfta korrekt märkning och renhet av peptider
Kvalitetskontrollen av stabila isotopmärkta peptider beror på två nyckelpunkter: om märkningen är korrekt eller inte, och om renheten är tillräcklig eller inte.
Högupplöst MS: noggrann massräkningsbekräftelse, för att se om märkningen är komplett.
HPLC: leta efter renhet och leta även efter omärkta peptidrester.
Aminosyraanalys: valfritt, för att bekräfta förhållandet mellan märkta aminosyror.

Varför behöver du att vi gör en stabil isotopmärkningspeptid?

1. Vi har gjort detta i 20 år
Stabil isotopmärkt -peptid låter som "syntetiserad med tyngre aminosyror", men märkta aminosyror är dyra, varierande och har speciella reaktionsförhållanden, så det skiljer sig från vanlig syntes. Under årens lopp har vi hjälpt våra kunder att göra olika typer av märkta peptider: från den enklaste ¹³C-enkel-märkningen till den komplexa ¹³C+¹⁵N-dubbel-märkningen och från små peptider till medellånga-peptider har vi samlat på oss erfarenhet.

2. Vi har ett komplett utbud av märkta aminosyror
¹³C-märkning: alanin, arginin, isoleucin, leucin, lysin, fenylalanin, prolin, treonin, tyrosin, valin och så vidare.
¹⁵N-märkning: enkel eller dubbel märkning av ¹⁵N för olika aminosyror
Deuteriummärkning: d3-Ala, d3-Leu, d5-Phe, d10-Leu, etc.
Dubbelmärkning: ¹³C+¹⁵N kombination med större massförskjutning

3. Garanterat överflöd, inga halv-assade peptider.
What is the biggest fear of stable isotope labeled peptides? Incomplete labeling, mixing with unlabeled peptides, and then the quantification will not be accurate. We use labeled amino acids with >99 % överflöd, kontrollera syntesprocessen strikt och bekräfta slutligen att det inte finns någon omärkt peptidrester med hög-MS.

4. Renhet på begäran, inget slöseri med pengar
Konventionell renhet (95-98%): tillräckligt för masspektrometri kvantitativ metodutveckling och intern standard.
High purity (>98%): kliniska diagnostiska standarder, absolut kvantifiering, stabilare resultat.

5. Kompletta uppgifter, märkning kan spåras.
Vi tillhandahåller hög-MS-data för varje märkt peptid, och det exakta massnumret matchas för att bevisa att märkningen är korrekt.

6. Hela vägen från metodutveckling till klinisk testning.
Efter att ha hittat en bra märkt peptid intern standard finns det ofta ett behov av mer-uppföljningsarbete: som amplifiering av syntesen, upprättande av en GMP-version för klinisk diagnos. vetenskap-Peptiden kan vara sömlös, samma projektledare att följa till slutet, utan att behöva upprepa kommunikationen.

Stabila isotopmärkta peptider

Forskningsområde	Hur man använder	Rekommenderade märkningstyper
Proteomics	Absolut kvantifiering av SRM/MRM	¹³C eller ¹³C+¹⁵N-märkning
Metabolomics	Metabolisk flödesanalys	Helt märkt eller specifikt märkt
Klinisk diagnostik	Kvantifiering av sjukdomsmarkör	Hög renhet, ¹³C-märkning
Farmakokinetik	Kvantifiering av peptidläkemedel	¹³C eller ²H-märkning
Enzymkinetik	Kvantifiering av enzymklyvningsprodukter	¹⁸O-märkning (C-terminal)

Leverans och kvalitetskontroll

Leverans: lyofiliserat pulver, centrifugrör eller flaskor
Medföljande dokument: COA (HPLC renhetskarta, hög-MS-masspektrometri med hög upplösning), syntesrapport (valfritt)
Valfria tester: aminosyraanalys, peptidhalt, endotoxin
Anpassad förpackning: Enligt dina krav, märkning och förpackning

Innan varje stabil isotopmärkt peptid skickas kommer vi att granska märkningen, renheten och molekylvikten för att säkerställa fullständiga data och tillförlitlig kvalitet.

Tre riktiga fall

Fall 1: Internt märkningsprojekt av en proteomikplattform.

The customer needed to establish MRM quantification methods for 10 biomarkers in plasma, and the corresponding stable isotope-labeled peptides were required as internal standards. We synthesized 10 ¹³C6-Arg-labeled peptides (each labeled with Arg at the C-terminus) with abundance >99% and purity >95 %. Kunden etablerade en kvantitativ metod med dessa interna standarder med ett linjärt intervall på 3 storleksordningar.

Fall 2: Läkemedelsföretagets PK-forskningsprogram

Klienten utvecklar en terapeutisk peptid och behöver göra farmakokinetiska studier, så den måste syntetisera en isotopmärkt version av peptiden som en intern standard. Vi syntetiserade ¹³C5,¹⁵N1-Val-märkt peptid och introducerade en märkt aminosyra i sekvensen. Hög-MS bekräftade den fullständiga märkningen och klienten mätte framgångsrikt läkemedelskoncentrationen i plasma med LC-MS/MS.

Fall 3: Forskningsprojekt om ämnesomsättning

För att studera metabolismen av grenade-aminosyror behövde kunden korta peptider märkta med ¹³C6-Leu och ¹³C5-Val som spårämnen. Vi syntetiserade Leu-Val-Phe-tripeptider, som var märkta med ¹³C vid Leu-positionen respektive Val-positionen, och spårade framgångsrikt de metaboliska flödena av dessa peptider i cellulära upptagsexperiment.

Vilka är dina behov av stabila isotopmärkta peptider?

Oavsett om du gör proteomikkvantifiering, farmakogenetiska studier eller metabolisk flödesanalys, så länge du behöver märka peptidens interna standard, kan du prata med oss.

Vad du behöver berätta för mig:
Peptidsekvens
Vilken aminosyra du vill märka (position och typ av märkning)
Isotoptyp (¹³C, ¹⁵N, ²H, etc.)
Hur mycket behövs (mg)
Krav på renhet

Ge dig en detaljerad offert och genomförbarhetsfeedback inom 24 timmar.